Caccianiga G, Urso E, Monguzzi R, Gallo K, Rey G
Efecto bactericida del láser de diodo en periodoncia
131
AVANCES EN PERIODONCIA/
* Università degli Studi « Milano Bicocca », Clínica Odontológica. Director: Prof. Marco Baldoni.
** Doctorado de Investigación en Periodontología Experimental. Università degli Studi «Milano Bicocca», Clínica Odontológica.
*** Fundador del I.M.L.A. (International Medical Láser Academy).
Efecto bactericida del láser de diodo en periodoncia
CACCIANIGA G*
URSO E**
MONGUZZI R*
GALLO K**
REY G***
RESUMEN
El láser en odontología, gracias a su capacidad antibacteriana, hemostática y de menor sinto-
matología operatoria, encuentra un amplio campo de aplicación en el ámbito de la terapia
periodontal.
En este estudio ha sido probada la eficacia de un protocolo que prevé la utilización asociada
de irradiación láser y de agua oxigenada con el fin de reducir a carga bacteriana de cepas
comúnmente presentes en las bolsas periodontales activas y resistentes a la acción bacterici-
da de solamente la irradiación láser como la Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum y
Peptostreptococcus micron.
La metodología de laboratorio preveía el siguiente protocolo: cada una de las suspensiones
bacterianas ha sido expuesta al agua oxigenada a una concentración del 3% y ha sido irradia-
da con láser por 10, 15 o 20 segundos utilizando tubos estériles Eppendorf de 1,5 ml.
Los resultados confirman la mayor eficacia bactericida de la acción combinada de agua
oxigenada y láser. Los cultivos microbiológicos efectuados revelan como, no obstante el efecto
bactericida, el láser tiene una escasa acción sobre las cepas bacterianas testadas si no es
asociado al agua oxigenada. En particular, en el caso de la Prevotela intermedia y del Fuso-
bacterium nucleatum, la utilización de agua oxigenada al 3% solamente ha dado resultado
mejores respecto a solamente el láser, mientras que la asociación de los dos tratamientos ha
dado siempre óptimos resultados. En el caso del Peptostreptococcus micron, la utilización
de agua oxigenada y el láser separadamente han dado una escasa disminución de la cuenta
bacteriana mientras que la asociación de los tratamientos ha potenciado la acción bacteri-
cida.
PALABRAS CLAVE
Láser de diodo, bacterias, peróxido de hidrógeno.
Fecha de recepción: Febrero 2007.
Aceptado para publicación: Marzo 2007.
Caccianiga G, Urso E, Monguzzi R, Gallo K, Rey G. Efecto bactericida
del láser de diodo en periodoncia. Av Periodon Implantol. 2007; 19,
1: 131-139.
132/AVANCES EN PERIODONCIA
Volumen 19 – Nº 3 – Dicembre 2007
INTRODUCCIÓN
Debido a su capacidad antibacteriana, hemostática y
de menor sintomatología operatoria, el láser encuen-
tra un vasto campo de aplicación en el ámbito de la
terapia periodontal.
El término láser es el acrónimo de Light Amplification
by Stimulated of Radiation (amplificación de la luz por
emisión estimulada de radiación) y los varios tipos
de láser se distinguen sobre la base del material ópti-
camente estimulado. En particular, los láser de diodo
más comúnmente utilizados son los láser a arseniuro
de galio y aluminio que emiten una longitud de onda
de 810 µm.
La eficacia bactericida del láser ha sido demostrada
por varios estudios. Sin embargo, después del trata-
miento láser asistido, el análisis de cultivos microbio-
lógicos ha evidenciado la presencia de microorganis-
mos tales como Prevotella intermedia, Fusobacterium
nucleatum y Peptostreptococcus micron, comúnmen-
te presentes en las bolsas periodontales y por lo tanto
con resistencias diferentes al efecto láser.
Para potenciar el efecto del láser el Dr. Rey ha redac-
tado un protocolo operativo que incluye, además del
tratamiento láser asociado, las maniobras de scaling
y root planing, el empleo de agua oxigenada, po-
tente antibacteriano activo en bacterias gram+,
gram–, esporas y virus, pero que sola no tiene acti-
vidad sobre las bacterias mencionadas preceden-
temente.
El protocolo establece:
1. Eliminación del tártaro con un equipo de ultrasoni-
do con anestesia local hasta el fondo de la bolsa
periodontal bajo irrigación con substancias a base
de povidona iodada.
2. Pulido de la superficie de la raíz con un chorro de
bicarbonato, necesario para detoxificar el cemen-
to de la raíz y abrir los túbulos dentinales (que se
vuelven accesibles a la acción del láser).
3. Irrigación de las bolsas periodontales con agua
oxigenada a 10 vol.
4. Irradiación láser del epitelio y del fondo de la bol-
sa periodontal con movimientos rápidos en contacto
con el tejido.
5. Irradiación láser del cemento de la raíz con movi-
mientos lentos a aproximadamente 1 µm de distan-
cia de la superficie de la raíz.
OBJETIVO DEL TRABAJO
El objetivo del presente estudio es el de testar la efi-
ciencia bactericida del protocolo elaborado por el Dr.
Rey que establece el empleo asociado de irradiación
láser y de agua oxigenada a una concentración del 3%
con el fin de disminuir la carga bacteriana de cepas
comúnmente presentes en las bolsas periodontales
activas. En particular se ha querido testar el empleo
del láser de diodo Oralia 810 µm con varios protoco-
los operativos que necesitan el empleo de distintas
potencias y fibras de distintos diámetros.
El objetivo de la investigación láser ha sido principal-
mente el de evaluar el efecto fotodinámico (fotoquí-
mico) evitando posiblemente el efecto fotoablativo y
el efecto térmico.
El estudio ha tomado en examen 3 cepas bacterianas:
—Prevotella intermedia.
—Peptostreptococcus micron.
—Fusobacterium nucleatum.
Fig.1: Láser de diodo Oralia 810 µm.
Caccianiga G, Urso E, Monguzzi R, Gallo K, Rey G
Efecto bactericida del láser de diodo en periodoncia
133
AVANCES EN PERIODONCIA/
MATERIALES Y MÉTODO
Los estudios han sido efectuados simulando lo más
posible las condiciones de empleo clínico en vivo:
1. Irradiación láser por 10 segundos partiendo del
fondo del tubo:
a) Movimiento vertical por 5 segundos.
b) Movimiento rotatorio por 5 segundos.
2. Lavado con peróxido de hidrógeno al 3%:
a) Volumen igual a 1/3 de la solución inicial
b) Tiempo de contacto de 3 minutos.
3. Comparación del aumento de la temperatura de los
distintos test.
TEST
Han sido utilizados 10 tubos numerados del 1 al 10 con
un cultivo conteniendo Prevotella intermedia, Peptos-
treptococco micron e Fusobacterium nucleatum.
Cada una de las suspensiones bacterianas, expuesta o
no al agua oxigenada, ha sido irradiada con el láser,
utilizando tubos estériles “Eppendorf “ de 1,5 ml. Fue-
ron utilizados otros 10 cultivos iniciales como control.
—Tubo 1: • Tubo de estudio.
• Un cultivo final fue realizado al fin de la
experiencia.
—Tubo 2: • Lavados de H
2O2 – 10 vol.
Los tubos 3 y 4 fueron utilizados siguiendo el programa
de descontaminación aconsejado por el fabricante.
—Tubo 3: • Sólo irradiación láser por 5 segundos.
• Irradiación continua -1W- fibra de 400 µm.
• Se nota el inmediato aumento de la tem-
peratura.
—Tubo 4: • Sólo irradiación láser por 10 segundos
• Irradiación continua -1W- fibra de 600 µm.
• Se nota el inmediato aumento de la tem-
peratura.
El tubo 5 ha sido utilizado siguiendo el mismo progra-
ma del tubo 6 con la finalidad de comparar la eficien-
cia con o sin peróxido de hidrógeno.
—Tubo 5: • Sólo irradiación láser –programa GR4
por 10 segundos.
• GR4= 2,5W-1,2J-50Hz (1/1) – fibra 600 µm
•Se nota el inmediato aumento de la tem-
peratura.
Los tubos 6, 7, 8, 9 y 10 fueron utilizados siguiendo el
protocolo del Dr. Rey (efecto fotoquímico del láser con
peróxido de hidrógeno).
—Tubo 6: •Láser + 1/3 H
2O2 10 vol.
•Programa láser GR4= 2,5W-1,2J-50Hz
(1/1) – fibra 600 µm por 10 segundos.
—Tubo 7: •Láser + 1/3 H
2O2 10 vol.
•Programa láser GR3= 2W-1J-50Hz (1/1) –
fibra 600 µm por 10 segundos.
—Tubo 8: •Láser + 1/3 H
2O2 10 vol.
•Programa láser GR2= 1W-0,5J-50Hz
(1/1) – fibra 600 µm por 15 segundos.
—Tubo 9: •Láser + 1/3 H
2O2 10 vol.
•Programa láser GR1= 0,6W-0,3J-50Hz
(1/1) – fibra 400 µm por 20 segundos.
—Tubo 10:•Láser + 1/3 H
2O2 10 vol.
•Programa láser GR5= 4W-2J-500Hz (1/1) –
fibra 600 µm por 15 segundos.
Fig.2.
134/AVANCES EN PERIODONCIA
Volumen 19 – Nº 3 – Dicembre 2007
RESULTADOS
El empleo exclusivo del H
2O2 en concentración del 3%
ha llevado a una reducción de las colonias bacteria-
nas de 10–3 igual al 99,95% en el caso del fusobacetrium
nucleatum, de 10–1 igual al 90% en el caso del Peptos-
treptococcus micron y a una reducción del 10–5 igual al
99,999% en el caso de la Prevotella intermedia; el em-
pleo exclusivo de la irradiación láser por 10 segundos,
sea a la potencia de 1 W que a 2,5 W, no ha sido eficaz en
reducir el número de colonias bacterianas en el caso
del Fusobacterium nucleatum, mientras que el empleo
de la irradiación láser asociada con el H
2O2 ha produci-
do una notable disminución de las mismas; en particu-
lar el empleo de la fibra de 400 µm por 20 segundos a
una potencia de 0,6W-0,3J-50Hz y la fibra de 600 µm
por 15 segundos con una regulación de 4W-2J-500 Hz,
asociados al H
2O2 han llevado a una reducción de 10–6
igual a casi el 100% de las colonias bacterianas. Muy
interesante es la comparación entre las pruebas de los
tubos 5 y 6; el tubo 5 ha sido utilizado siguiendo el mis-
mo programa del tubo 6 con la finalidad de comparar
la eficacia de la irradiación láser con o sin peróxido
de hidrógeno, los resultados muestran la ineficacia de
la sola irradiación láser, mientras que en el caso de la
asociación de los dos tratamientos muestran una re-
ducción de 10–5 igual a 99,999% de las colonias.
En las colonias bacterianas de Peptostreptococcus
micron el empleo exclusivo de la irradiación láser por
10 segundos, sea a la potencia de 1 W que a 2,5 W, no
ha sido eficaz en reducir el número de colonias bacte-
rianas, mientras que el empleo de la irradiación láser
asociada al H
2O2 ha mostrado una disminución de las
mismas de 10–2 en los casos de los tubos 6 (2,5W-1,2J-
50Hz (1/1) – fibra 600 µm), 7 (2W-1J-50Hz (1/1) – fibra
600 µm), 8 (1W-0,5J-50Hz (1/1) – fibra 600 µm) e 9
(0,6W-0,3J-50Hz (1/1) – fibra 400 µm) y una reducción
de 10–3, o sea del 99,95% en el caso del tubo 10 (4W-
2J-500Hz (1/1) – fibra 600 µm). También en este caso la
comparación entre los tubos 5 y 6 al final de la prueba
muestra como utilizando la misma regulación del lá-
ser los resultados son mucho mejores en el caso de la
asociación con el H
2O2.
La irradiación láser por 10 segundos con regulación 1
W – 1 J sea con la fibra de 400 µm que con la de 600 µm
no ha llevado a una reducción significativa de las colo-
nias bacterianas en el caso de la Prevotella interme-
dia, mientras que el empleo de la fibra de 600 µm con
la regulación igual a 2.5W-1.2J-50Hz ha llevado a una
reducción de 10–1 igual al 90% de las colonias bacte-
rianas. El empleo del láser con distintas regulaciones
asociado con el H
2O2 ha dado en las distintas pruebas
una disminución de las colonias bacterianas de 10–6
igual a casi el 100%.
Los resultados de los diferentes test han sido reporta-
dos en las tablas de 1 a 3.
DISCUSIÓN
En el caso del fusobacetrium nucleatum y de la
Prevotella intermedia los análisis microbiológicos han
revelado como el empleo exclusivo de agua oxigena-
da ha dado resultados mejores que la sola exposición
a la irradiación láser. En cambio el empleo de los dos
tratamientos asociados ha llevado a una marcada dis-
minución de las colonias bacterianas.
En el caso del Peptostreptococcus micron el empleo
exclusivo del tratamiento láser no ha producido nin-
guna reducción apreciable de las colonias bacteria-
nas, mientras que el empleo de agua oxigenada ha
Fig.3.
Caccianiga G, Urso E, Monguzzi R, Gallo K, Rey G
Efecto bactericida del láser de diodo en periodoncia
135
AVANCES EN PERIODONCIA/
TABLA 1.- TEST EFECTO BACTERICIDA LÁSER DE DIODO ORALIA 810 µm SOBRE
FUSOBACTERIUM NUCLEATUM
Tubo Cultivo H
2O2 Esposición Regulación Tiempos Cultivo
inicial 3% láser de diodo láser totales final
810 µm
1 Pura No No Tubo de estudio 40 min Pura
cultivo fin de la
experiencia
El tubo 2 ha sido adicionado con 1/3 de peróxido de hidrógeno sin irradiación láser.
2 Pura 3 min +1/3 No 3 min 10–3
Los tubos 3, 4 y 5 fueron expuestos a distintas irradiaciones láser sin agregado de peróxido de hidrógeno.
3 Pura No 10 seg 1W – 1J continua 3 min Pura
fibra 400
4 Pura No 10 seg 1W – 1J continua 3 min Pura
fibra 600
5 Pura No 10 seg 2,5W-1,2J-50Hz 3 min Pura
(1/1) – fibra
600 µm
Los tubos 6, 7, 8, 9 y 10 fueron adicionados con peróxido de hidrógeno siguiendo el protocolo del Dr. Rey.
6 Pura Sí +1/3 10 seg 2,5W-1,2J-50Hz 3 min 10–5
(1/1) – fibra
600 µm
7 Pura Sí +1/3 10 seg 2W-1J-50Hz 3 min 10–5
(1/1) – fibra
600 µm
8 Pura Sí +1/3 15 seg 1W-0,5J-50Hz 3 min 10–5
(1/1) – fibra
600 µm
9 Pura Sí +1/3 20 seg 0,6W-0,3J-50Hz 3 min 10–6
(1/1) – fibra
400 µm
10 Pura Sí +1/3 15 seg 4W-2J-500Hz 3 min 10–6
(1/1) – fibra
600 µm
Pura: Aproximadamente 2.000.000.
10-1: Aproximadamente 200.000, disminución del 90%.
10-2: Aproximadamente 20.000, disminución del 99%.
10-3: Entre 500 y 2.000, disminución del 99,95%.
10-4: Entre 100 y 500, disminución del 99,987%
10-5: Entre 10 y 20, disminución del 99,999%.
10-6: Entre 1 y 10.
136/AVANCES EN PERIODONCIA
Volumen 19 – Nº 3 – Dicembre 2007
TABLA 2.- TEST SOBRE PEPTOSTREPTOCOCCUS MICRON
Tubo Cultivo H
2O2 Esposición Regulación Tiempos Cultivo
inicial 3% láser de diodo láser totales final
810 µm
1 Pura No No Tubo de estudio 40 min Pura
cultivo fin de la
experiencia
El tubo 2 ha sido adicionado con 1/3 de peróxido de hidrógeno sin irradiación láser.
2 Pura 3 min +1/3 No 3 min 10–1
Los tubos 3, 4 y 5 fueron expuestos a distintas irradiaciones láser sin agregado de peróxido de hidrógeno.
3 Pura No 10 seg 1W – 1J continua 3 min Pura
fibra 400
4 Pura No 10 seg 1W – 1J continua 3 min Pura
fibra 600
5 Pura No 10 seg 2,5W-1,2J-50Hz 3 min Pura
(1/1) – fibra
600 µm
Los tubos 6, 7, 8, 9 y 10 fueron utilizados con peróxido de hidrógeno siguiendo el protocolo del Dr. Rey.
6 Pura Sí +1/3 10 seg 2,5W-1,2J-50Hz 3 min 10–2
(1/1) – fibra
600 µm
7 Pura Sí +1/3 10 seg 2W-1J-50Hz 3 min 10–2
(1/1) – fibra
600 µm
8 Pura Sí +1/3 15 seg 1W-0,5J-50Hz 3 min 10–2
(1/1) – fibra
600 µm
9 Pura Sí +1/3 20 seg 0,6W-0,3J-50Hz 3 min 10–2
(1/1) – fibra
400 µm
10 Pura Sí +1/3 15 seg 4W-2J-500Hz 3 min 10–3
(1/1) – fibra
600 µm
Pura: Aproximadamente 2.000.000.
10-1: Aproximadamente 200.000, disminución del 90%.
10-2: Aproximadamente 20.000, disminución del 99%.
10-3: Entre 500 y 2.000, disminución del 99,95%.
10-4: Entre 100 y 500, disminución del 99,987%
10-5: Entre 10 y 20, disminución del 99,999%.
10-6: Entre 1 y 10.
Caccianiga G, Urso E, Monguzzi R, Gallo K, Rey G
Efecto bactericida del láser de diodo en periodoncia
137
AVANCES EN PERIODONCIA/
TABLA 3.- TEST SOBRE PREVOTELLA INTERMEDIA
Tubo Cultivo H
2O2 Esposición Regulación Tiempos Cultivo
inicial 3% láser de diodo láser totales final
810 µm
1 Pura No No Tubo de estudio 40 min Pura
cultivo fin de la
experiencia
El tubo 2 ha sido adicionado con 1/3 de peróxido de hidrógeno sin irradiación láser.
2 Pura 3 min +1/3 No 3 min 10–5
Los tubos 3, 4 y 5 fueron expuestos a distintas irradiaciones láser sin agregado de peróxido de hidrógeno.
3 Pura No 10 seg 1W – 1J continua 3 min Pura
fibra 400
4 Pura No 10 seg 1W – 1J continua 3 min Pura
fibra 600
5 Pura No 10 seg 2,5W-1,2J-50Hz 3 min 10–1
(1/1) – fibra
600 µm
Los tubos 6, 7, 8, 9 y 10 fueron utilizados con peróxido de hidrógeno siguiendo el protocolo del Dr. Rey.
6 Pura Sí +1/3 10 seg 2,5W-1,2J-50Hz 3 min 10–6
(1/1) – fibra
600 µm
7 Pura Sí +1/3 10 seg 2W-1J-50Hz 3 min 10–6
(1/1) – fibra
600 µm
8 Pura Sí +1/3 15 seg 1W-0,5J-50Hz 3 min 10–6
(1/1) – fibra
600 µm
9 Pura Sí +1/3 20 seg 0,6W-0,3J-50Hz 3 min 10–6
(1/1) – fibra
400 µm
10 Pura Sí +1/3 15 seg 4W-2J-500Hz 3 min 10–6
(1/1) – fibra
600 µm
Pura: Aproximadamente 2.000.000.
10-1: Aproximadamente 200.000, disminución del 90%.
10-2: Aproximadamente 20.000, disminución del 99%.
10-3: Entre 500 y 2.000, disminución del 99,95%.
10-4: Entre 100 y 500, disminución del 99,987%
10-5: Entre 10 y 20, disminución del 99,999%.
10-6: Entre 1 y 10.
138/AVANCES EN PERIODONCIA
Volumen 19 – Nº 3 – Dicembre 2007
revelado una disminución poco significativa. La aso-
ciación de los dos tratamientos ha potenciado su ac-
ción bactericida llevando a una disminución significa-
tiva de las colonias bacterianas.
CONCLUSIONES
Los test microbiológicos han demostrado la plena efi-
ciencia de la asociación láser – agua oxigenada sobre
todas las especies bacterianas citadas precedentemen-
te. Los cultivos microbiológicos efectuados revelan
como, no obstante el efecto bactericida, el láser tiene
una escasa acción sobre las cepas bacterianas testa-
das si no es asociado al agua oxigenada. En particular
en el caso de la Prevotella intermedia y del fusoba-
cetrium nucleatum el empleo exclusivo agua oxigena-
da al 3% ha dado resultados mejores respecto a la ex-
clusiva irradiación láser, mientras que la asociación de
los dos tratamientos ha siempre dado óptimos resulta-
dos. En el caso del Peptostreptococcus micron el em-
pleo de agua oxigenada y del láser separadamente
han dado una escasa disminución de la carga bacte-
riana mientras que la asociación de los tratamientos
ha potenciado su acción bactericida.
ABSTRACT
Laser in odontology, thanks to its antibacterial capa-
bilities, haemostatic and of minor operating sympto-
matology, finds a vast field of application within the
framework of periodontal therapy.
In this study has been tested the effectiveness of a
protocol that foresees the associated use of laser
irradiation and hydrogen peroxide with the goal of
reducing the bacterial charge of stocks commonly
present in the active periodontal pockets and resistant
to the bactericide action of laser irradiation alone such
as Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum,
Peptostreptococcus micron.
The laboratory method used foresees the following
protocol: each bacterial suspension has been exposed
to hydrogen peroxide at 3% concentrations and it has
been irradiated with laser for 10, 15 or 20 seconds,
using sterile 1.5 ml Eppendorf tubes.
The results confirm the higher bactericide effec-
tiveness of the combined action of hydrogen peroxide
and laser.
The microbiological cultivations carried out reveal how,
in spite of the bactericide effect, the laser has an
insufficient action on bacterial stocks tested if it isn’t
associated with hydrogen peroxide. Particularly in the
case of the Prevotella intermedia or the Fusobacterium
nucleatum the use of just hydrogen peroxide at 3% has
offered better results than the laser irradiation alone
while the association of both treatments has always
offered optimal results. In the case of the Peptostrep-
tococcus micron the use of hydrogen peroxide and laser
separately has offered an insufficient reduction of the
bacterial count while the association of treatments has
increased their bactericide action.
KEY WORDS
Diode laser, bacteria, hydrogen peroxide.
Fig.4.
Caccianiga G, Urso E, Monguzzi R, Gallo K, Rey G
Efecto bactericida del láser de diodo en periodoncia
139
AVANCES EN PERIODONCIA/
RÉSUMÉ
Le laser en odontostomatologie, pour ces propriétès
antibacteriques, émostatiques et antalgiques, est bien
utilizè en parodontologie.
Le but de cette récherche est de tester un protocol en
vitro sur l’association du laser et de l’eau oxigénée,
pour reduir les bacterias les plus résistents dans les
poches parodontales, comme Prevotella intermedia,
Fusobacterium nucleatum, Peptostreptococcus micros.
30µl de sospension bactérienne (en utilisand des
eppendorf srérilesde 1,5 ml) a étè traitè avec l’eau
oxigénée à 3%, en irradiand avec le laser pour 5 ou
10, 15, 20 seconds.
Les résultats confirment l’éfficacité de cette combi-
nation eau oxigénée/laser sur touts les trois bacterias.
Particulierement sur prevotella intermedia et fusobac-
terium nucleatum l’eau oxigénée à 3% est plus efficace
que le laser tout seul, ainsi que pour le peptostrep-
tococcus micron la seule association est éfficace.
AGRADECIMIENTOS
Un particular agradecimiento al Dr. Marcos José
Maggiani por su importante contributo científica y de
redacción.
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CORRESPONDENCIA
Dott. Gianluigi Caccianiga
Via Simoncini 20
24100 – Bergamo (BG)
Italy
e-mail: gianluigi.caccianiga@unimib.it